基因測(cè)序改良無(wú)法培養(yǎng)細(xì)菌提供測(cè)序方法
發(fā)布時(shí)間:2011-09-14
本報(bào)訊美國(guó)物理學(xué)家組織網(wǎng)9月18日?qǐng)?bào)道,最近,來(lái)自美國(guó)加利福尼亞大學(xué)圣地亞哥分校、克雷格·文特爾研究院和Illumina公司的科學(xué)家對(duì)現(xiàn)代基因測(cè)序算法進(jìn)行了改良,只需從一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中提取的DNA(脫氧核糖核酸)就可組裝成接近完整的基因組,準(zhǔn)確率達(dá)到90%,而傳統(tǒng)的測(cè)序方法至少需要10億個(gè)相同的細(xì)胞才能完成。這一突破為那些無(wú)法培養(yǎng)的細(xì)菌提供了測(cè)序方法。研究發(fā)表在9月18日的《自然·生物技術(shù)》網(wǎng)絡(luò)版上。
實(shí)驗(yàn)室無(wú)法培養(yǎng)的細(xì)菌范圍極廣,約占99.9%,從產(chǎn)生抗體和生物燃料的微生物,到人體內(nèi)的寄生菌。它們的生存條件特殊,比如必須和其他菌種共生,或只能生存在動(dòng)物皮膚上,因此很難進(jìn)行人工培養(yǎng)。
論文合著者、文特爾研究院的羅杰·拉斯肯教授10年前曾開(kāi)發(fā)出一種多重置換擴(kuò)增(MDA)技術(shù),可對(duì)實(shí)驗(yàn)室無(wú)法培養(yǎng)的細(xì)菌測(cè)序,能恢復(fù)70%的基因。其工作原理是對(duì)一個(gè)細(xì)胞的基因片斷多次復(fù)制,直到其數(shù)量相當(dāng)于10億個(gè)細(xì)胞那么多。不過(guò),這種技術(shù)卻給測(cè)序軟件帶來(lái)很多麻煩,它在復(fù)制DNA時(shí)會(huì)出現(xiàn)各種錯(cuò)誤,而且并非完全統(tǒng)一放大,有些基因組被復(fù)制數(shù)千次,有一些卻只被復(fù)制一兩次。但測(cè)序算法不能處理這些不一致,而是傾向于舍棄那些只復(fù)制了少數(shù)次的基因,即使它們對(duì)整個(gè)基因組來(lái)說(shuō)很關(guān)鍵。
加州大學(xué)圣地亞哥分校雅各布工程學(xué)院計(jì)算機(jī)科學(xué)教授、現(xiàn)代基因測(cè)序技術(shù)算法創(chuàng)建人帕維爾·帕夫納和同事改進(jìn)了這一方法,保留了那些少量復(fù)制的基因片斷,并用新方法對(duì)一個(gè)大腸桿菌測(cè)序以檢驗(yàn)其精確性,發(fā)現(xiàn)它能恢復(fù)91%的基因,接近傳統(tǒng)的培養(yǎng)細(xì)胞水平。這已足夠解答許多重要的生物學(xué)問(wèn)題,比如該細(xì)菌能產(chǎn)生什么抗體。
人體細(xì)菌占體重的約10%,它們有些會(huì)造成傳染病,但也有的能幫助消化,最近研究還發(fā)現(xiàn),它們能改變?nèi)说男袨榉绞?,比如引誘人吃更多的東西。新方法也有助于科學(xué)家理解細(xì)菌行為,研究人體內(nèi)細(xì)菌能產(chǎn)生哪種蛋白質(zhì)和多肽,這些蛋白質(zhì)和多肽是細(xì)菌之間、細(xì)菌和宿主之間互相溝通的工具。
研究小組還用新方法對(duì)一種以前未曾測(cè)序過(guò)的海洋細(xì)菌進(jìn)行了測(cè)序,獲得了相當(dāng)完整而且能解釋的基因組,掌握了它是如何生存和運(yùn)動(dòng)的,該基因組將被存入美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究院的基因銀行(GenBank)。研究人員表示還將對(duì)更多迄今未知的細(xì)菌進(jìn)行測(cè)序。